植物ELISA試劑盒采用酶聯(lián)免疫分析檢測法可快速、準確地測定植物。多種簡便、可靠、精準、穩(wěn)定性好的生化檢測試劑盒和ELISA檢測試劑盒。
在植物ELISA試劑盒實驗中,選擇好各項ELISA實驗條件是很重要的,其中包括:
?。?)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗體的選擇:將抗體吸附在固相載體表面時,要求純度要好。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。
?。?)酶標記抗體工作濃度的選擇:先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。