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    黃曲霉PCR試劑盒的收集處理和使用方法

    點擊次數(shù):734次  更新時間:2021-01-21
       黃曲霉PCR試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分。現(xiàn)代食品加工工藝更大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。
     
      黃曲霉PCR試劑盒的收集、處理及保存方法:
      1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
     
      2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
     
      3.細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
     
      4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
     
      5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
     
      黃曲霉PCR試劑盒的使用方法:
      1)使用方法簡介以用2mg總RNA為例。在無RNase離心管中,加入0.5mg引物至含總RNA的樣品中,總體積不大于15ml。70℃,5分鐘打開模板鏈形成的二級結(jié)構(gòu)。立即放于冰上降溫防止二級結(jié)構(gòu)恢復(fù),隨后短暫離心使液體集中在離心管底。
     
      2)加入以下成分到已退火后的引物-模板混合物中。
     
      3)輕輕混勻離心管,如果使用隨機引物在37℃孵育60分鐘,其他引物則42℃孵育。延伸溫度在37~42℃之間。
     
      4)用于合成cDNA的*鏈。往后的合成則需要根據(jù)需要自行設(shè)計引物再次合成。
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