參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒價(jià)格
英文名稱:Histoplasm spp.PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒價(jià)格原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
喹乙醇中文別名: 喹酰胺醇;2-[N-(2-羥基-乙基)-氨基甲酰]-3--喹惡啉-1,4-二氧化物 英文名: Olaquindox 英文別名: 2-(n-(2-hydroxyethyl)karbamoyl)-3-methylchinoxalin-1,4-dioxid CAS登錄號: 23696-28-8 分子式: C12H13N3O4
去亞甲基小檗堿英文名: Demethyleneberberine 英文別名: Dibenzo[a,g]quinolizinium,5,6-dihydro-2,3-dihydroxy-9,10-dimethoxy CAS登錄號: 25459-91-0 分子式: C19H18NO4 分子量: 324.35
歐夾竹桃苷中文別名: 歐夾竹桃甙;歐蓮素 英文名: Oleandrin 英文別名: (3-beta,5-beta,16-beta)-hexopyranosyl)oxy)-14-hydroxy CAS登錄號: 465-16-7 分子式: C32H48O9
小檗紅堿英文名: Berberrubine 英文別名: 9-Berberoline CAS登錄號: 15401-69-1 分子式: C19H15NO4 分子量: 321.33
脫氫紫堇堿中文別名: 去氫紫堇堿 英文名: Dehydrocorydaline 英文別名: 13-Methyl-2,3,9,10-tetramethoxy-5,6-dihydrodibenzo[a,g]quinolizinium CAS登錄號: 30045-16-0 分子式: C22H24NO4
延胡索甲素英文名: (+)- Corydaline 英文別名: 2,3,9,10-tetramethoxy-13-alpha-methyl-13a-beta-berbin CAS登錄號: 518-69-4 分子式: C22H27NO4 分子量: 369.44
芫花素中文別名: 芫花黃素 英文名: Genkwanin 英文別名: 4H-Benzopyran-4-one CAS登錄號: 437-64-9 分子式: C16H12O5
野黃芩素中文別名: 金黃紫堿;黃岑配基;高黃芩素;野黃芩黃素 英文名: Scutellarein 英文別名: 4',5,6,7-Tetrahydroxyflavone; 5,6,7-Trihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-chromen-4-one CAS登錄號: 529-53-3 分子式: C15H10O6
喬松素中文別名: 松屬素 英文名: Pinocembrin 英文別名: (s)-2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-phenyl-4h-1-benzopyran-4-one CAS登錄號: 480-39-7 分子式: C15H12O4
反式茴香腦英文名: cis-Anethol 英文別名: (E)-1-METHOXY-4-(1-PROPENYL)BENZENE CAS登錄號: 104-46-1 分子式: C10H12O 分子量: 148.2
3,6′-二芥子酰基蔗糖英文名: 3, 6′-Disinapoyl Sucrose 英文別名: DISS CAS登錄號: 新品待定分子式: C34H42O19 分子量: 754.68
組織胞漿菌通用PCR檢測試劑盒價(jià)格甘氨酸鈉,500gLanthanum oxide 質(zhì)量規(guī)格:AR
L-脯氨醇,100gMolybdenum 質(zhì)量規(guī)格:>96%
L-脯氨醇,1gSULFATE STANDARD 質(zhì)量規(guī)格:AR,99%
L-脯氨醇,25gPotassium nitrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
L-脯氨醇,5gTRI-N-BUTYLPHOSPHONIUM TETRAFLUOROBORATE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
N-乙酰-L-纈氨酸,100g4'-Hydroxy-4-biphenylcarbonitrile 質(zhì)量規(guī)格:AR,99%
N-乙酰-L-纈氨酸,25g2,7-Naphthalenedisulfonic acid disodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%
N-乙酰-L-纈氨酸,5gNA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,BR
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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