技術(shù)特點(diǎn):
1利什曼原蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6產(chǎn)品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品名稱 | 利什曼原蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱 | Leishmania spp.PCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
N-乙酰-L-賴氨酸/N-Acetyl-L-lysineBR,97%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1946-82-3RT
N-乙酰-L-丙氨酸/N-乙酰-L-α-丙氨酸/N-乙酰基-L-丙氨酸/N-Acetyl-L-alanineBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,97-69-82~8℃
N-乙酰-D-色氨酸/D-α-N-乙酰氨基-β-吲哚丙酸/D-α-N-乙酰胺基-β-吲哚丙酸/N-乙酰基-D-色氨酸/N-Acetyl-D-tryptophanBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,97-69-8保存:-20℃
N-乙酰-D-亮氨酸/N-乙酰-D-白氨酸/N-乙?;?D-亮氨酸/N-Acetyle-D-LeucineBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,19764-30-8保存:-20℃
N-乙酰-L-脯氨酸/N-Acetyl-L-ProlineBR,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,68-95-12~8℃
N-乙酰-D-脯氨酸/N-Acetyl-D-ProlineBR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,16395-58-7RT
N-乙酰-L-肉堿鹽酸鹽/O-乙酰基-L-肉堿鹽酸鹽/2-乙酰氧基-3-*銨基丁酸氯化物/鹽酸乙?;罂嵬?L-乙酰肉堿氯化物/ALC/ALCARBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5080-50-22~8℃
α-酮基纈氨酸鈣鹽/3-甲基-2-氧丁酸鈣鹽/3-甲基-2-氧代丁酸鈣鹽/酮纈氨酸鈣/Calcium alpha-ketovalineBR,97%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,51828-94-5RT
芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯/9-芴甲基-N-琥珀酰亞氨基碳酸酯/N-(9氫-氟-2-甲氧基)琥珀酰胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯/FMOC-OSUBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,82911-69-1RT
2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-偶氮苯丙三氮唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/雙(二甲基氨基)甲叉-三唑[4,5-B]吡啶3-氧化物六氟磷酸鹽/2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯/O-(7-氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-氮雜苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/HATUBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,16395-58-72~8℃
CBZ-L-纈氨酸/N-芐氧羰基-L-纈氨酸/N-芐氧羰?;?L-纈氨酸/N-CBZ-L-ValineBR,98.5%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1149-26-4RT
D-異亮氨酸/D-異白氨酸/(2R,3R)-2-氨基-3-甲基戊酸/D-lsoleucineBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,319-78-8RT,避光
β-丙氨酸乙酯鹽酸鹽/β-丙胺酸乙酯鹽酸鹽/氨基乙酸乙酯/β-Alanine ethyl ester HC1BR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,4244-84-2RT
L-丙氨酰胺鹽酸鹽/L-丙胺酰胺鹽酸鹽/L-Alaninamide hydrochlorideBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,33208-99-0RT
利什曼原蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格5'-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽,100gPATENT BLUE V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽,500g3-Aminophenylboronic acid monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:工業(yè)級(jí)
8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽,25gTriethoxyvinylsilane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
8-氨基-1-萘酚-3,6-二磺酸單鈉鹽,100gNA 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,對(duì)照品
N-乙酰-DL-色氨酸,5gwujingan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
N-乙酰-DL-色氨酸,25gSodium 2-(7-(3,3-dimethyl-1-(4-sulfonatobutyl)benz(e)indolin-2-ylidene)hepta-1,3,5-trien-1-yl)-3,3-dimethyl-1-(4-sulfonatobutyl)benz[e]indolinium 質(zhì)量規(guī)格:CP
N-乙酰-DL-色氨酸,1g1-TETRADECENE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品
DMEM高糖(不含酚紅),10*1LTetrakis(hydroxymethyl)phosphonium sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥96%,標(biāo)準(zhǔn)品
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