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磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)生化檢測(cè)試劑盒

型 號(hào)

產(chǎn)品時(shí)間2023-11-06

所屬分類糖酵解系列

報(bào)價(jià)

產(chǎn)品描述:磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)生化檢測(cè)試劑盒磷酸丙糖異構(gòu)酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi),在機(jī)體內(nèi)參與糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。

產(chǎn)品概述

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產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)生化檢測(cè)試劑盒

100/96 50/48   

EY-01S1169

 

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測(cè)定意義

磷酸丙糖異構(gòu)酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi),在機(jī)體內(nèi)參與糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。

測(cè)定原理

磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。

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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。

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1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。

2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測(cè)。

3、血清等液體:直接測(cè)定。

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(1)按照蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量13.png

(4)按液體體積計(jì)算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應(yīng)體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1min。

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假單胞菌     /

 


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