A875人黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

EPS8： 表皮生長(zhǎng)因子受體底物8抗體 人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474 大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 Phospho-Stathmin(Ser38)： 0酸化原癌基因蛋白18抗體 小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1

Bel-7404細(xì)胞，人肝癌細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO 小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)ELISA試劑盒 phospho-STMN2 (Ser50)： 0酸化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白SCG10抗體 IL21R Others Human 人 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHLEC cDNA 小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)ELISA試劑盒 phospho-STXBP1 (Ser515)： 0酸化神經(jīng)突觸前膜胞內(nèi)蛋白抗體 MLA144 MLA144長(zhǎng)臂猿淋巴瘤細(xì)胞

Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml 小鼠胺氧化酶(含黃素)A(MAOA)ELISA試劑盒 Phospho-Syk (Tyr323)： 0酸化非受體型酪酸蛋白激酶抗體 U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 Rabbit IgG 兔IgG(親和層析化) 10mg

LHX5： LHX5蛋白抗體 Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 腎癌細(xì)胞,RCC-krause細(xì)胞 SK-HEP-1(肝癌細(xì)胞)

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)ELISA試劑盒 Rabbit IgG/PE-Cy3 熒光素PE-Cy3標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對(duì)照) 0.1ml

LIM kinase 1 + 2： 單絲酸蛋白激酶1+2抗體 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;BHK-21

CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 CHL hamster lung cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠中期因子(MK)ELISA試劑盒 Rabbit IgM (親和化) 兔IgM 1mg

A875人黑色素瘤細(xì)胞表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA 試劑盒 PAPPA 相關(guān)血漿蛋白A 1mg

HIF-1 beta： 缺氧誘導(dǎo)因子1β /HIF-1β抗體 豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞;LCM4 中國(guó)倉(cāng)鼠體細(xì)胞，R 1610細(xì)胞 IAR20細(xì)胞，大鼠肝細(xì)胞

CEACAM1 Others Rat 大鼠 CEACAM1 / CD66a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體(ATA)ELISA 試劑盒 TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1(抗原) 0.5mg

HSTF2： 熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體 HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系

VE細(xì)胞，人血管內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,NS-1細(xì)胞 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUVEC cDNA 人抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)ELISA 試劑盒 Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mg

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。