MCF-7人乳腺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

腸動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗馬IgM 0.1ml

FBXL20： FBXL20蛋白抗體 細胞名稱 種屬

HUtSMC-c 人類子宮平滑肌細胞(HUtSMC) 500,000cells 原代心肌細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml 兔子瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗馬IgM 0.1ml

FBXL15： FBXL15蛋白抗體 CM-H024人胰腺星狀細胞培養(yǎng)基100mL

A-498(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2 兔子醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗馬IgM 0.1ml

MAD1： 有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體 HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0443SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠硝基酪酸()ELISA試劑盒 NE (Rabbit neutrophil elastase)  兔子中性粒細胞彈性蛋白酶 96T

10-Mar： 膜相關環(huán)指蛋白10抗體 小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP

NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MCF7(癌細胞) 大鼠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Bacillus thuringiensis,BT  蘇云金芽孢桿菌蛋白 96T

MALT1： 粘膜相關淋巴組織淋巴瘤轉運蛋白1抗體 中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I

MCF-7人乳腺癌細胞HaCaT細胞，人正常皮膚細胞 淋病柰瑟氏菌 小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);DG6-VAP33-GFP 人反狀腺原酸(3)ELISA 試劑盒 FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉錄因子)抗原 0.5mg

HHV8 ORF50： 人類皰疹病毒8抗體 JAG1 Others Human 人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人細胞裂解液 (陽性對照)

豚鼠胚胎細胞;104C1 人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA 試劑盒 FOXM1/HFH 11 peptide 插頭蛋白M1抗原 0.5mg

H2N2 Hemagglutinin： 甲型流感病毒血凝素抗體 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501

MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA 試劑盒 Measles virus of fusion protein 麻疹病毒抗原(麻疹病毒融合蛋白) 0.5mg

注意事項：

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產(chǎn)生）。