UT-7人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

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Galactocerebroside： 半乳糖腦苷脂酶抗體 Saos-2，人成骨肉瘤細(xì)胞 Human

HPAEC Pellet 人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 心肌細(xì)胞生長添加物CMGS 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

GRK5： G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP

SW1116(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人早老素2(PS-2)ELISA 試劑盒 IgG/APC APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

GTP binding protein REM1： GTP結(jié)合蛋白REM1抗體 CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CSAG1 Others Human 人 CSAGE / CSAG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠素受體2(C2)ELISA試劑盒 LN(Mouse Laminin)  小鼠層連蛋白/板層素 96T

NEGR1： 神經(jīng)生長調(diào)節(jié)蛋白1抗體 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-acf-prf

293LVT人胚腎細(xì)胞--用于慢病毒包裝 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine 大鼠素受體1(C1)ELISA試劑盒 ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1)  人細(xì)胞間粘附分子1 96T

Netrin G1/G2： 軸突生長誘向因子G2抗體 MME Others Mouse 小鼠 MME / CD10 / NEP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0047C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠松弛肽/松弛素1(RLN1)ELISA試劑盒 大鼠淋巴細(xì)胞因子 大鼠淋巴細(xì)胞因子 96T

UT-7人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞REG1A Others Rat 大鼠 REG1A / PSPS 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人β乳糖蛋白抗體IgG ELISA 試劑盒 PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽) 0.5mg

IARS2： tRNA異亮酸連接酶抗體 CM-H006人肺動脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞 SRSV/3T3(SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞) 人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA 試劑盒 PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 型纖溶酶原激活因子(多肽) 0.5mg

Integrin alpha 2/CD49b： 整合素α2抗體 EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0903 人β羥(β-OHB)ELISA 試劑盒 Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。