MDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

OLR1 Others Rat 大鼠 OLR1 / LOX1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人戊肝抗原(HEV-Ag)ELISA試劑盒 IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml

GDNFRA： GDNF家族受體α-1抗體 小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h

SiHa細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠血細(xì)胞,WEHI-3細(xì)胞 子宮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人無(wú)形體抗體(HGA-Ab)ELISA試劑盒 IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml

Gemin 2： 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體 CES5A Others Mouse 小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-M052小鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml

NIMP： NOGO相互作用線(xiàn)粒體蛋白1抗體 原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml

3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1 mouse embryonic fibroblasts DMEM+10%FBS 大鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA試劑盒 NGAL(Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin)  人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 96T

NLGN4X： 神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體 EGFR Others Human 人 EGFR / ErbB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H068人膀胱上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒 AP12  大鼠apelin 12 96T

NLGN4Y： 神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體 黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR

MDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞新生兒表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 犬狀腺原酸(T3)ELISA 試劑盒 midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1(抗原) 0.5mg

IGHD： D重鏈保守區(qū)抗體 MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 小鼠脂肪細(xì)胞，3T3-L1細(xì)胞 SP2/0(骨髓瘤細(xì)胞)

CD34 Others Rat 大鼠 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 犬前列腺特異性抗原(PSA)ELISA 試劑盒 midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原) 0.5mg

IGLK： IV型己糖激酶抗體 C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA

CFSC-8B細(xì)胞，大鼠肝星形細(xì)胞 L-02(正常肝細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));F9-CAG-tTA-3E5 犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 一種細(xì)胞應(yīng)激分子抗原 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。