SK-MEL-28人黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-h cDNA 小鼠γ-基(γABA)ELISA試劑盒 phospho-ZNF598(Tyr306)： 0酸化鋅指蛋白598抗體 MMQ 小鼠垂體瘤細(xì)胞

Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨分化培養(yǎng)基無(wú)誘導(dǎo)劑(即用型) 100ml 小鼠γ-基(GABA)ELISA試劑盒 PI14： 蛋白酶抑制劑14抗體 HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系

Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠γ基(GABA)ELISA試劑盒 PIG54： 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體 人表皮淋巴內(nèi)管皮細(xì)胞(HDLEC)(5×105)

T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 小鼠γ基(GABA)ELISA 試劑盒 Rat secretory IgA： 分泌型A抗體 人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

PRKAR1A Others Human 人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠γ-谷酰轉(zhuǎn)移酶1(γGT1)ELISA試劑盒 RNF142： 環(huán)指蛋白142抗體 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2087

LRRTM2： 富含亮酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體 大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1

K-562人慢性髓原白血病細(xì)胞 K-562 chronic myelogenous leukemia cells 1640+10% FBS 大鼠脂素1(LPIN1)ELISA試劑盒 Streptavidin/AP 堿性0酸酶標(biāo)記鏈霉親和素 0.1ml

LRRTM4： 富含亮酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體 FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人神經(jīng)細(xì)胞HM 大鼠脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)ELISA試劑盒 Streptavidin/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素 0.1ml

LZIC： LZIC蛋白抗體 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素);AtT-20

SK-MEL-28人黑色素瘤細(xì)胞TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人抗著絲點(diǎn)抗體(ACA/CENP)ELISA 試劑盒 Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原 0.5mg

HBeAg(2E6)： 人乙型肝炎e抗原單克隆(檢測(cè))抗體 WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞

EC-304細(xì)胞，人血管內(nèi)皮細(xì)胞 小鼠腎癌細(xì)胞,Kert-3細(xì)胞 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞總RNAHCPEpiC NA 人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA 試劑盒 Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原) 0.5mg

hHb(H5A3)： 小鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體 HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));F9-CAG-tTA-1A3 人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA 試劑盒 FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子( 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)(多肽片斷抗原) 0.5mg