傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

94T778人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠V-Ha-Ras肉瘤病毒癌基因同源物(HRAS)ELISA試劑盒 Serum Amyloid P： 血清淀粉樣蛋白P成份抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901

HepG2.2.15細(xì)胞，表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞 小鼠胃癌細(xì)胞,MFC細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO 小鼠VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)ELISA試劑盒 SESN3： Sestrin3抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

胰島素鐵硒傳遞蛋白 100xITS 小鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA試劑盒 SET： SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體 CT-26 WT 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞

Promocell C-23060 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium, 骨骼肌細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠V-Ets骨髓成紅細(xì)胞增多癥病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA試劑盒 SET： SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體 CL-0406NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MGC80-3(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠V-Erb小鼠B2紅白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)ELISA試劑盒 SETBP1： SET結(jié)合蛋白1抗體 人齒根膜韌帶成纖維細(xì)胞(HPDLF)( 5×105 )

LRP15： 富含亮酸重復(fù)序列LRP15抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2

Daudi人Butt's淋巴瘤細(xì)胞 Daudi human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA 試劑盒 Goat Anti-human IgA 羊抗A 0.2ml

LRRTM1： 富含亮酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白1抗體 IL10RB Others Human 人 IL10Rb 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠載脂蛋白F(APOF)ELISA試劑盒 k-chain 兔抗人k-鏈 1mg

Laminin 2 alpha： 層粘蛋白α2抗體 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815

94T778人高分化脂肪肉瘤細(xì)胞CRELD1 Others Human 人 CRELD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA 試劑盒 IRS-1 胰島素受體底物-1(抗原) 0.5mg

MV hemagglutinin glycoprotein： 麻疹病毒血凝素抗體 RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞

SF17細(xì)胞，人腦瘤細(xì)胞 洋蔥假單胞菌 人角膜細(xì)胞總RNAHK NA 人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA 試劑盒 AQP3(aquaporin 3) 水通道蛋白-3抗原 0.5mg

HOXC5： 同源盒蛋白HOXC5抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795 人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA 試劑盒 IRS-2 胰島素受體底物-2(抗原) 0.5mg