傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

ihESCs永生化人子宮內(nèi)膜異位基質(zhì)細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

動(dòng)物星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-a 小鼠IL2誘導(dǎo)T細(xì)胞激酶(ITK)ELISA試劑盒 SOCS3： 細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體 NG108-15 大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

Promocell C-27410 Preadipocyte Growth Medium, 前脂肪細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml 小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 SOD1： 超氧化物歧化酶1抗體 CL-0235TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

P19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)ELISA試劑盒 SOD2： 超氧化物歧化酶2抗體 人骨骼肌星形細(xì)胞(HSkMSC)(5×105)

人張氏肝細(xì)胞;Chang liver 小鼠IgE-Fc片段受體Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA試劑盒 SOD3： 超氧化物歧化酶3抗體 人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572) 大鼠腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 小鼠G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)ELISA試劑盒 SODD： Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C

腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 HBeAg(立可讀) 乙型肝炎e抗原 96T

MyoGEF： 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795

HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM 大鼠音猬因子(SHH)ELISA試劑盒 HBeAb(立可讀) 乙型肝炎e抗體 CM-R086大鼠真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

IGF2BP2 Protein Human 重組人 IGF2BP2 / IMP2 / p62 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) 大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 HBcAb(立可讀) 乙型肝炎核心抗體 VDR Others Human 人 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA 試劑盒 HBcAb(IgM) 乙型肝炎核心抗體 Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞 肌母細(xì)胞,L-6TG細(xì)胞 Cates-1B(人淋巴胚胎性癌細(xì)胞)

ihESCs永生化人子宮內(nèi)膜異位基質(zhì)細(xì)胞SF767(人腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人抗副流感病毒IgG抗體(ai-PIV IgG )ELISA 試劑盒 NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 合成酶-3(抗原) 0.5mg

HPV18 E6 protein： 人類狀瘤病毒18 E6抗體 CD40LG Others Canine 狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

SD大鼠骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells 人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(ai-RV IgM)ELISA 試劑盒 NPY ( Neuropeptide Y) 神經(jīng)肽 Y(抗原) 0.5mg

HPV16-E7： 人類狀瘤病毒16-E7抗體 兔腎細(xì)胞;RK-13 白血病細(xì)胞，KG-1細(xì)胞 MFC-GFP細(xì)胞，綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞

IL25 Others Rat 大鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(ai-RV IgG)ELISA 試劑盒 NR2B (Glutamate receptor) 谷酸受體(抗原) 0.5mg