傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

K1人甲狀腺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FAM3B/PANDER： 胰腺衍生因子抗體 RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 Rattus

HTSMC-c 人類氣管平滑肌細胞(HTSMC) 500,000cells 原代肝實質(zhì)細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml 兔子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml

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801-D (人巨細胞性肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 兔子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml

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CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠心型脂肪酸結合蛋白(FABP3)ELISA試劑盒 IAP(Human inhibitor of apoptosis)  人細胞凋亡抑制因子 96T

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NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 大鼠心肽(ANP)ELISA試劑盒 BMP-4(Mouse Bone morphogenetic protein 4)  小鼠骨成型蛋白4 96T

Phospho-MYPT1 (Ser668)： 0酸化肌球蛋酸酶抗體 家貓肺細胞;FCA-L1

IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 標簽) 大鼠心0脂抗體IgA(ACA IgA)ELISA試劑盒 Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3  植物25羥基維生3 96T

K1人甲狀腺癌細胞Phospho-HSL (Ser660)： 0酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 THY1 Others Mouse 小鼠 THY1 / CD90 人細胞裂解液 (陽性對照)

犬腎細胞;MDCK/IgR 人肺表面活性物質(zhì)相關蛋白D(SP-D)ELISA 試劑盒 Ezrin/Radixin 埃茲蛋白(多肽) 0.5mg

HURP： 肝癌上調(diào)蛋白抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9402

MA-782(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 人肺表面活性物質(zhì)相關蛋白C(SP-C)ELISA 試劑盒 F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽) 0.5mg

Hrasls3： HRAS樣抑制因子3抗體 胎牛血清FBS