HLF人肺成纖維樣細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GCP3： γ-微管蛋白復(fù)合物GCP3抗體 大鼠骨髓瘤細胞;IR983F

NCI-H661(人大細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA 試劑盒 IgG/Cy7 Cy7標記的小鼠抗人IgG 0.1ml

GAMT： 胍基乙酸N甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)(5×105)

人肺成纖維細胞總RNAHPF NA 人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3(AF3)ELISA試劑盒 IgM/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗人IgM 0.1ml

GANC： α-葡萄糖苷酶C抗體 雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12 小鼠牙細胞培養(yǎng)基 100mL

小鼠肝竇內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒 HABP(Mouse Hya]uronate binding protein)  小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 96T

NCR1： 細胞毒性受體NK-p46抗體 MFC細胞，胃癌細胞 綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞,MGC803-GFP細胞 恒河猴胚腎細胞;FRhK-4 [FRhK4]

IgG2a Others Mouse 小鼠 IgG2a-Fc 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠胎兒腎鈣黏蛋白(KCAD)ELISA試劑盒 CyPA(Mouse cyclophilin A)  小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A 96T

NCR3： 細胞毒性受體NK-p30抗體 上皮細胞生長添加物MEpiCGS

RAG小鼠腎腺癌細胞 RAG mice renal adenocarcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS 大鼠羧肽酶N2(CPN2)ELISA試劑盒 BMPs  大鼠骨形成蛋白 96T

HLF人肺成纖維樣細胞IFRD1： 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細胞，A-704細胞 AGS(胃腺癌細胞)

CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) 人白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒 ompF(putative outer membrane porin F protein) 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原 0.5mg

ILP2： 抑制細胞凋亡樣蛋白2抗體 CM-H047人肝竇內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL

SAC-II B2細胞，小鼠腹水瘤細胞 BRL 3A(大鼠肝細胞) 人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1 人白介素17A(IL-17A)ELISA 試劑盒 OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原 0.5ml

IFITM1： 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體 FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細胞裂解液 (陽性對照)