運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 葡萄糖苷曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Mannheimia glucosidaPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1葡萄糖苷曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
核糖核酸(酵母)/核酸/RNABR,90%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,63231-63-02~8℃
轉(zhuǎn)移核糖核酸(酵母)/t-RNABR,15~20A260單位/mg100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9014-25-92~8℃
脫氧核糖核酸(魚精)/DNA(魚精)/DNABR,85%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
脫氧核糖核酸(鯡魚精)/DNA(鯡魚精)/DNABR,85%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2~8℃
脫氧核糖核酸(鮭魚精)/DNA(鮭魚精)/脫氧核糖核酸鈉(鮭魚精)DNA/DNA Na高純,90%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,9007-49-22~8℃
脫氧核糖核酸(小牛胸腺)/DNA(小牛胸腺)/脫氧核糖核酸鈉(小牛胸腺)DNA/DNA NaBR,90%100毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,73049-39-52~8℃
生物技術(shù)級(jí),5mg/ml10毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,
4-氯苯氧乙酸/對(duì)氯苯氧乙酸/對(duì)氯苯氧醋酸/促生靈/番茄通/p-氯苯氧乙酸/防落素/防落壯果劑/4-CPA/IUPACCP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,122-88-3RT
4-氯苯氧乙酸鈉/對(duì)氯苯氧乙酸鈉/4-Chlorophenoxyacetic acid sodium saltCP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13730-98-8RT
2,4-二氯苯氧乙酸/2,4-滴/2,4-D酸/2,4-DCP,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,94-75-7RT
2,4-二氯苯氧乙酸鈉/2,4-滴鈉/2,4-D鈉/2,4-D sodium salt試劑級(jí),98%25克國產(chǎn)2702-72-9RT
氯吡苯脲/氯吡脲/調(diào)吡脲/吡效隆醇/吡效隆/KT-30/CPPU/4PU-30/CN-11-3183試劑級(jí),98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,68157-60-8RT
6-甲基香豆素/6-甲基苯并吡喃酮/6-甲基氧雜萘鄰/6-甲基-2H-1-苯并吡喃-2-酮/6-Methylcoumarin高純,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,92-48-8RT
7-羥基-4-甲基香豆素/4-甲基傘形酮/羥甲香豆素/膽通/4-甲基傘形花內(nèi)酯/β-甲基傘形花精/β-甲基傘形花內(nèi)酯/4-MUBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,90-33-5RT
葡萄糖苷曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒多少錢Phthalide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品;Hh信號(hào)通路拮抗劑,作用于Smo
Turpentine oil 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
2-FLUORO-5-METHYLPHENOL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Iodine monochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
(1S,2S)-(-)-1,2-Diphenyl-1,2-ethanediamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HEKTOEN ENTERIC AGAR FOR 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
(2-FURYL)GLYOXYLIC ACID 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
METHYL 2-METHYL-4-HYDROXY-2H-THIENO[2,3-E]-1,2-THIAZINE-3-CARBOXYLATE-1,1-DIOXIDE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
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