人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

球狀少突細(xì)胞培養(yǎng)基OsM 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml

GPI： 糖0脂酰肌醇抗體 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E 胸膜細(xì)胞瘤，SMC-1細(xì)胞 RIN-m細(xì)胞，褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞

LMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人K1(VK1)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml

phospho-gp130 (Ser782)： 0酸化gp130抗體 小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r

RL95-2細(xì)胞，人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素),AtT-20細(xì)胞 人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA 人(VE)ELISA 試劑盒 IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Beijing/22808/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 大鼠皮質(zhì)酮(CO)ELISA試劑盒 AFU(Mouse alpha-L-fucosidase)  小鼠αL巖藻糖苷酶 96T

NELL2： 蛋白激酶C結(jié)合蛋白NELL2抗體 胰腺星狀細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

NCI-H929-CMV-EGFP(穩(wěn)定株)人骨髓瘤細(xì)胞 NCI-H929-CMV-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活) 大鼠結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA試劑盒 CsA  大鼠A 96T

NETO2： 腦特異性跨膜蛋白抗體 EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H044人肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠(Coisol)ELISA試劑盒 SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen)  人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原 96T

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞IDUA： α-L-艾杜糖苷酶抗體 MVK Others Human 人 MVK / Mevalonate kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 犬白細(xì)胞分化抗原6(CD6)ELISA 試劑盒 NTP，Neurual thread protein 神經(jīng)絲蛋白(抗原) 0.5mg

IFT122： 細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白122抗體 MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞，hFOB 1.19細(xì)胞 PIEC(豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞)

TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒 OAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源) 0.5mg

IFT140： 細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白140抗體 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422